Влияние дезинфицирующих средств на значения RLU при АТФ-тестировании

28.11.2024
Одной из основных задач предприятий пищевой промышленности является обеспечение безопасности здоровья потребителя через выпуск безопасной продукции. Предприятие может удовлетворить эти требования только за счет обязательного соблюдения утвержденных санитарных правил и нормативов.

В России производство пищевых продуктов регламентируется следующими основными нормативными документами:

СанПиН 2.3.2.1078-01 «Гигиенические требования к безопасности и пищевой ценности пищевых продуктов». Согласно документа на предприятиях пищевой промышленности обязательным является организация и проведение мойки и дезинфекции производственных помещений, оборудования, инвентаря, тары, транспортных средств. Во-первых, это необходимо для микробиологической безопасности поставляемого сырья определенного качества, выпускаемой продукции, во-вторых, для предотвращения возможности ее вторичной контаминации патогенными микроорганизмами и вирусами, в-третьих, для предотвращения заражения инфекционными болезнями работающего персонала.Дезинфицирующие средства разработаны для уничтожения микроорганизмов с оборудования или поверхностей, контактирующих с пищевыми продуктами. Многие моющие и дезинфицирующие средства содержат компоненты, которые расщепляют или разрушают органические остатки, такие как жиры, белки и биологические мембраны. На сегодняшний день используются различные дезинфицирующие средства, содержащие либо одно активное соединение, либо смесь.

Для контроля качества процесса очистки используются быстрые тесты, которые дают результаты практически мгновенно. Наиболее часто применяемый в отрасли метод основан на обнаружении АТФ (аденозинтрифосфата), основного носителя энергии живых организмов. Поскольку все живые клетки, включая бактерии, дрожжи и плесень, содержат АТФ, его присутствие может служить признаком биологического загрязнения.
АТФ-тестирование приобрело особую популярность для оценки санитарной обработки, поскольку технологическое оборудование можно оценить за секунды, а не за несколько дней. Системы быстрого тестирования аденозинтрифосфата (АТФ) основаны на ферментативной реакции люциферина в оксилюциферин, катализируемой люциферазой в присутствии Mg2+ и кислорода. Эта реакция приводит к испусканию света (биолюминесценция), который можно измерить люминометром для количественной оценки АТФ.
Поскольку одна молекула АТФ производит один фотон света, интенсивность света от реакции пропорциональна количеству АТФ в образце. Поверхности оборудования с высокими значениями АТФ также имеют высокие значения RLU, предположительно потому, что они имеют более высокую концентрацию микроорганизмов и, следовательно, больше АТФ.

Известно, что некоторые вещества ингибируют обнаружение АТФ, особенно когда они присутствуют в высоких концентрациях. К ним относятся активные соединения дезинфицирующих средств.

 Компания Hygiena провела исследование по оценке влияния дезинфицирующих средств на значение RLU. Большинство обычных дезинфицирующих средств (10 мкл в рабочей концентрации) не оказывают существенного влияния на результаты, полученные с помощью тест-устройств UltraSnap™ или SuperSnap™.
     • Реагенты SuperSnap более устойчивы к воздействию дезинфицирующих средств, чем UltraSnap. Для некоторых дезинфицирующих средств, где происходит ингибирование ферментов в UltraSnap, SuperSnap может стать альтернативой.
     • Чтобы избежать любое негативное воздействие дезинфицирующего средства, рекомендуется проводить АТФ-тестирование после очистки моющим средством и перед окончательной дезинфекцией. Этот процесс гарантирует, что дезинфицирующие средства и трудозатраты не будут потрачены впустую на дезинфекцию поверхностей, которые были неправильно и безуспешно очищены.

Цель исследования: определить влияние дезинфицирующих средств в рабочей концентрации на результаты тест-систем Hygiena UltraSnap и SuperSnap.

Подготовка образца

 АТФ (динатриевая соль) была разбавлена в стерильной апирогенной воде (PFW) из сертифицированного исходного раствора (2x10-2 моль) до концентрации 2x10-7 моль. 10 мкл этого разбавления наносили на кончик тампона каждого теста UltraSnap и SuperSnap. Дезинфицирующие средства были разбавлены в воде до рекомендуемой производителем рабочей концентрации, и 5 мкл наносили на каждый из кончиков тампона (отдельно от воды или раствора АТФ).


Методика проведения исследования:

 Активность тестового устройства АТФ измерялась следующим образом:
1. Извлекали тампон из пробирки.
2. Наносили дозатором 10 мкл стерильной апирогенной воды или раствора АТФ непосредственно на центр кончика тампона.
3. Наносили дозатором 10 мкл дезинфицирующего средства (разбавленного до рабочей концентрации) или воды (в качестве контроля) на другую область кончика тампона.
4. Возвращали тампон в пробирку и активировали тестовое устройство.
5. Осторожно встряхивали, чтобы погрузить тампон в реагент в течение 10 секунд.
6. Измеряли результаты АТФ, вставив устройство в люминометр SystemSURE™ Plus.
7. Сравнивали результат RLU с ожидаемым результатом. Результаты выражаются в процентах от соответствующего контроля «без дезинфицирующего средства». Результаты представлены в Таблице 1.

Результаты
Значения RLU не зависят от большинства оцененных дезинфицирующих средств, которые включают в себя несколько активных соединений. В условиях этого эксперимента некоторые дезинфицирующие средства дали небольшое снижение сигнала, а другие дезинфицирующие средства небольшое увеличение.
Некоторые дезинфицирующие средства в концентрации, использованной в этом эксперименте, значительно снизили сигнал АТФ. Однако неизвестно, является ли это достоверным результатом; дезинфицирующие средства следует удалять с поверхности путем тщательного ополаскивания, а концентрация, используемая в этом эксперименте, может быть слишком высокой. В тех случаях, когда остаточные дезинфицирующие средства значительно влияют на значения RLU, пользователи должны учитывать, что эти остаточные дезинфицирующие средства не могут или не должны оставаться на поверхностях и что дополнительное ополаскивание или смывание с поверхностей снизит риск ингибирования.

     Указание на то, что остаточные дезинфицирующие средства являются очень ингибирующими, может указывать на то, что эти дезинфицирующие средства потенциально вредны для пользователя и должны быть смыты с поверхностей. В качестве альтернативы, при использовании ингибирующих дезинфицирующих средств Hygiena рекомендует проводить тестирование после очистки моющим средством, но перед окончательной дезинфекцией. Дезинфицирующие средства, отражающие эту рекомендацию, выделены желтым цветом.

 Некоторые дезинфицирующие средства в этом исследовании сильнее ингибировали UltraSnap (>30% ингибирования), чем SuperSnap. Для этих дезинфицирующих средств Hygiena рекомендует использовать тестовые устройства SuperSnap. Дезинфицирующие средства, отражающие эту рекомендацию, выделены синим цветом.