Набор foodproof® Enterobacteriaceae plus Cronobacter Detection Kit представляет собой современную тест-систему для качественного обнаружения ДНК бактерий семейства Enterobacteriaceae с одновременной идентификацией Cronobacter spp. методом ПЦР в реальном времени. Набор предназначен для использования в пищевой промышленности и лабораториях контроля качества.
Комплектация набора включает:
- Master Mix (желтая крышка) - готовая смесь праймеров и зондов
- Раствор фермента (красная крышка) - Taq DNA полимераза и UNG
- Внутренний контроль (белая крышка) - контроль амплификации
- Контрольный образец (фиолетовая крышка) - положительный контроль
- H₂O, PCR-grade (прозрачная крышка) - отрицательный контроль
| Характеристика | Значение |
| Каталожный номер | KIT230043 |
| Количество реакций | 96 (до 94 образцов + контроли) |
| Объем реакции | 25 мкл |
| Каналы детекции | FAM (Cronobacter), VIC/HEX (Enterobacteriaceae), ROX/Texas Red (внутренний контроль) |
| Условия хранения | -15 до -25 °C |
| Назначение | Тестирование пищевых продуктов |
Набор прошел валидацию по стандарту MicroVal (ISO 16140-2:2016, сертификат № LR08/09/19/20) и демонстрирует высокую специфичность и чувствительность анализа. Продукт валидирован для testing детских смесей, детских каш, пробиотических продуктов, ингредиентов и образцов окружающей среды.
Протокол проведения анализа:
- Подготовка ПЦР-смеси: 18 мкл Master Mix + 1 мкл фермента + 1 мкл внутреннего контроля
- Внесение 20 мкл ПЦР-смеси в лунки планшета
- Добавление 5 мкл образца ДНК или контролей
- Проведение ПЦР по установленной программе
Программа амплификации:
- Предынкубация: 37°C - 4 мин, 95°C - 5 мин
- Амплификация (40 циклов): 95°C - 10 сек, 65°C - 70 сек (с уменьшением температуры на 0.1°C за цикл)
Интерпретация результатов:
| FAM | VIC/HEX | ROX/Texas Red | Результат |
| + | + | +/- | Положительный для Enterobacteriaceae и Cronobacter |
| - | + | +/- | Положительный для Enterobacteriaceae, отрицательный для Cronobacter |
| - | - | + | Отрицательный для Enterobacteriaceae и Cronobacter |
| - | - | - | Недействительный |
Набор включает систему предотвращения контаминации на основе урацил-ДНК-гликозилазы (UNG) и внутренний контроль для исключения ложноотрицательных результатов. Чувствительность метода составляет 1-10 клеток на 25/100 г образца.
Рекомендации по подготовке образцов
Для testing детских смесей и каш рекомендуется обогащение в BPW при 37°C в течение 18±2 часов. Для продуктов, содержащих пробиотики, рекомендуется добавление ванкомицина в среду обогащения. Для крахмалосодержащих продуктов необходимо добавление альфа-амилазы.